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Alamar Blue细胞增殖与毒性检测试剂盒图片
产品货号:
HR0494
中文名称:
Alamar Blue细胞增殖与毒性检测试剂盒
英文名称:
产品规格:
250T|500T|1000T
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒是应用新型的氧化还原指示剂阿尔玛蓝快速高灵敏度检测细胞增殖和细胞毒性的比色检测产品。
AlamarBlu 是一种氧化还原指示剂,能根据代谢活性产生吸光度变化和荧光信号。其在氧化状态下呈现紫蓝色无荧光性,而在还原状态下,转变为呈粉红或红色荧光的还原产物,其吸收峰为530-560nm,而散射峰为590nm。在细胞增殖过程中,细胞内NADPH/NADP、FADH/FAD、FMNH/FMN和NADH/NAD的比值升高,处于还原环境。摄入细胞内的染料被这些代谢中间体及细胞色素类还原后释放到细胞外并溶于培养基中,使培养基从无荧光的靛青蓝变成有荧光的粉红色。最后用普通分光光度计或荧光光度计进行检测,吸光度和荧光强度与活性细胞数成正比。这种染料经过验证安全无毒,用于细胞活性和细胞增殖的定量分析以及细胞因子生物测定和体外细胞毒性研究。这种测定是基于具有代谢活性的细胞将试剂转换成荧光和比色指示剂的能力。受损和无活性细胞具有较低的天然代谢活性,因此对应的信号较低。AlamarBlu的无毒特性使细胞可长期暴露于这种染料,因此可随时间进行测量或进行终点测量。
与台盼兰、TTC、MTT、MTS等分析法相比,阿尔玛蓝法具有更多的优势。阿尔玛蓝法采用单一试剂,可以连续、快速地检测细胞的增生状态。由于阿尔玛蓝对细胞无毒、无害,不影响细胞的抗体合成与分泌等活性,因此可以对同一批细胞的增生状态进行连续观察和进一步的实验观察,因此有操作简便和几乎不干扰细胞正常代谢的特点。

储存条件:2-8℃避光保存。
注意:
1.Alamar Blue存放于2-8℃,长期不用请分装后-20℃避光保存。
2.避免反复冻融。
3.冻存后溶解时注意重新混匀。
有效期:一年。

注意事项:
●本试剂盒仅供科学研究使用,不可用于诊断或治疗。
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖和管内壁上的液体离心至管底,避免开盖时试剂损失。
● 禁止与其他品牌的试剂混用,否则会影响使用效果。
● 样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
● 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。
● 需长时间保存可-20℃避光保存。避免反复冻融,最好小剂量分装,用避光袋或是黑纸、锡箔纸包住避光。
● 正式实验前,建议先做几个孔摸索接种细胞的数量和加入Alamar Blue试剂后的培养时间。
产品应用:
● 细胞增殖测定:AlamarBlu是水溶性的,在培养基中稳定且无毒;
● 细胞活性分析,包括细胞毒性:代谢活性以及染料的形成与细胞的活性和损伤成比例。
● 细胞因子分析:测定细胞因子诱导的增殖,必要时,可在试验结束时回收和扩增细胞。
检测方法:
●在 530-560 nm 激发,在 590 nm 发射荧光
●在 570 nm和 600 nm用分光光度计测定光吸收

产品特点:
● 使用方便:仅使用单一试剂;
●对哺乳动物或微生物细胞进行灵敏、无毒且安全的细胞活力和增殖测定;
● 能长期使用,持续进行测定而不损伤细胞或产生有毒废物;
● 灵活、简便- 能与多种仪器平台、96和 384孔板以及荧光或分光光度法测定兼容;
●可重复、快速 - 带加样、孵育及测定方案的同质分析对贴壁和悬浮细胞均有良好的可重复性。

试剂盒以外自备试剂和仪器:
● PBS ● 纯水 ● 移液器及吸头 ● 96孔培养板 ● CO2培养箱 ●酶标仪或分光光度计
使用注意事项:
● 合适密度的细胞可以增加检测灵敏度。对于96孔板,我们建议每孔接种100 μl细胞,细胞浓度范围为:贴壁细胞在100-10,000/孔,悬浮细胞在2,000-50,000/孔,并以培养基为空白对照。
对于384孔板,细胞浓度和接种量均减半。
● 整个过程均应为无菌操作,因为微生物污染物同样可以还原检测试剂而影响实验结果。
● 注意接种细胞浓度和加入检测试剂后孵育时间。细胞浓度过高或孵育时间过长,会导致继发性还原反应,产生无色和荧光消失。
● 孵育时,须避光。
●本产品可以使用荧光或分光光度检测,但荧光的灵敏度高,实验误差小,推荐使用荧光检测。
细胞活性、细胞增殖-毒性检测

使用方法:
1.细胞的增殖和细胞毒实验,一般可在96孔细胞培养板中进行。
2.每孔加入100μl细胞悬液。细胞的数量取决于实验目的和培养时间。增殖实验每孔通常加入103个以上数量的细胞;细胞毒性实验每孔至少加入5×103个或以上数量的细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等因素确定)。
3.接种的细胞按照实验需要,送入细胞培养箱进行培养。增殖实验通常要给予0-10μl特定的药物或生长因子进行刺激。细胞毒实验通常要给予0-10μl抑制因子或细胞毒药物;
4.培养结束后,取出阿尔玛蓝试剂,置室温融化混匀,于洁净工作台内按10μl/孔加入微孔板中,在细胞培养箱内继续孵育12-24小时,培养液颜色由蓝变为粉红(如采用荧光分光光度法,只需孵育2-8小时);
5.在 570nm 测定吸光度,参考波长600nm。如无此滤光片,可用 565nm和610nm的滤光片替代。
6.也可用荧光分光光度法检测,激发光波长在530-560nm之间,发射光波长为590 nm。检测时间可在结果以荧光强度表示。
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